氨基柱那些事

整個色譜柱家族中，擁有許許多多的不同特色的柱子。不同性質的色譜柱有著其*的作用方式。表一列出了日常工作中常規使用的幾類色譜柱的作用方式：

表一：不同填料色譜柱的作用方式

從上表可以看到，我們常使用的C8/C18僅能用于反相色譜，苯基與氟苯基也基本用于反相色譜；陰/陽離子交換（SCX/SAX）顧名思義則用于離子交換色譜了；而相對更少用的CN（氰基）、NH2（氨基）、硅膠色譜柱則有多種作用方式，或者單*種方式或者混合模式。

上表中NH2（氨基柱）則比較搶眼，表現的像個選手。從反相到正相，包括時下熱門的HILIC，甚至于離子交換模式均可以產生。那么，這個選手（NH2）是否就可以替代其他色譜柱了呢？答案當然是否定的。不僅僅在于其選擇性有很大的差異，更重要的，是氨基的色譜柱壽命普遍不長。

如果說C18是來自長壽村的，那氨基柱一定來自非洲的津巴布韋。壽命的差異不是一星半點。不同品牌的氨基柱，必然也會有壽命上的差異，但是影響更多的，是使用條件。

我們所說的氨基柱，通常是指硅膠基質鍵合氨丙基，如圖一所示：

我們知道，脂肪鏈末端的氨基通常堿性較強，以正丙胺為例，可推測氨基柱末端的氨基pKa應該也約為10：

我們還知道，作為硅膠基質的色譜柱，常規使用pH范圍是2~8。過低的pH，鍵合相會斷裂，過高的pH，硅膠將溶解。該柱子固有的自身帶進的氨基便是矛盾的存在，必然會影響壽命。此外，越短的鍵合相，壽命也可能越短。

在用于正相使用過程當中，壽命會相對好上一些。當用于RP/HILIC模式時，特別是添加有緩沖鹽的緩沖液時，甚至某些時候測酸性很強的樣品時，便會導致填料流失從而大大縮短色譜柱的使用壽命。

末端的氨基極易質子化，成為-NH3+，在分析某些帶有電負性較強基團的組分時，容易造成拖尾情況。微環境的離子強度可能也會影響色譜柱的壽命。

氨基柱是非常“復雜”和“脆弱”的色譜柱，這就要求我們必須更加細心的去維護。1、比如每次使用前先接上兩通，確保儀器系統中其他項目殘留的流動相已被置換*；2、比如在用于反相模式時，在開始使用前先用含有一定比例水相的不含緩沖鹽的流動相過渡，而不要直接上帶有鹽相，特別是較高鹽相的流動相——這是因為一般情況下，色譜柱都保存在純乙腈/純正相溶劑（如是正相溶劑，過渡模式需要更換，這個找機會在講過）中，不過渡的情況下很可能發生鹽析而破壞柱子，導致柱子壽命縮短；3、比如使用中確保不要配錯流動相，防止溶劑走空等；4、再比如使用后確保清除*柱子中的緩沖鹽，并保存在純有機相中（ACN）中；5、后需要提到的一點是，盡管4中要求沖洗*，但是并不是代表可以一直沖洗一直沖洗，壽命跟流經柱子的流動相體積也在一定情況下成反比，我們必須找到一個經綜合考慮后相對較優的中間點，如果無法確認是否沖洗干凈，我們一般認為，10~20個柱體積基本上就能保證沖洗干凈。柱體積怎么算？小編之前的文章中肯定有提到，對于內徑4.6mm的色譜柱，一個柱體積簡易的計算方式是0.1*L（柱長cm）。請記住沖洗的時間，定個鬧鐘，防止沖洗過渡而降低柱子的使用壽命。

該類柱子的使用帶來的另外一個問題是，隨著使用時間的增加，鍵合相不可避免的流失，重現性便會有所變化，需要特別關注。

當然，對于該類柱子，硅膠基質有常規的，有雜化的，有封尾的有不封尾的，壽命當然也會表現的不一樣。我們關心的選擇性和價格，必然也會有一些差異。至于選哪個，小編的回答就是萬金油，適合的就是zui hao的。

關于該類色譜柱更加詳細的使用方式，還是請參考每根柱子自帶的說明書，嚴格使用，便能保護好您的柱子。